Avaliação da longevidade de espermatozoides equinos congelados e descongelados submetidos a centrifugação e filtração / Evaluation of the longevity of freezed and thawed equine spermatozoa subject to centrifugation and filtration

Lucas Costa de Faria, João Lucas de Sousa Ataides, Francisco Jose Goncalves de Oliveira

Abstract


A indústria do cavalo movimenta, no Brasil, aproximadamente R$16 bilhões de reais por ano e gera 610 mil empregos diretos e indiretos. A demanda direcionada aos sistemas de criação viabilizou o desenvolvimento de biotécnicas que permitissem um maior e melhor potencial produtivo e reprodutivo de várias espécies. Entretanto, o sêmen equino congelado e descongelado apresenta, relativamente, baixas taxas de fertilidade. Isso ocorre devido aos danos causados pela criopreservação dos gametas masculinos que fazem com que ocorra redução da longevidade espermática. Nesse contexto, técnicas foram criadas com o objetivo de amenizar esses danos, tal como a separação do líquido seminal. A centrifugação e filtração aumentam a concentração por meio da retirada do líquido seminal, porém, podem causar danos à sua viabilidade. Sendo assim, objetivou-se com esse estudo avaliar os procedimentos de filtração e centrifugação dos espermatozoides congelados e descongelados, avaliando a longevidade das células pela observação das alterações dos aspectos físicos durante a incubação por até 90 minutos. Foram utilizadas partidas do esperma congelado de 10 equinos que foram divididas em 3 grupos: controle (CT), Centrífuga e Sperm Filter. O grupo controle não foi submetido a nenhum processo de separação mas apenas às análises de motilidade, vigor e contagem de células com membrana íntegra, nos cinco diferentes tempos (T0= 0 minuto, T20= 20 minutos, T40= 40 minutos, T60= 60 minutos e T90= 90 minutos) do Teste de Termorresistência (TTR). O grupo Centrífuga foi submetido à centrifugação por 10 minutos a 600 gravitacionais, ressuspendido em meio crioprotetor com glicerol e analisado durante os cinco diferentes tempos do TTR. O grupo Sperm Filter foi submetido à filtração através da membrana hidrofílica sintética e ressuspendido em meio crioprotetor com glicerol e analisado nos diferentes tempos do TTR. Nos 3 grupos foram analisados a motilidade total, vigor espermático e contagem de células com membrana íntegra. A análise dos dados foi feita utilizando ANOVA com teste de Tukey para motilidade e contagem de células com membrana íntegra e Kruskal-Wallis para o vigor. Os resultados indicaram que a filtração espermática com auxílio da membrana hidrofílica sintética tendeu a conservar melhor a motilidade espermática nos dois primeiros momentos (T0: P= 0,082; T20: P= 0,088). Contudo, nas seguintes avaliações, percebeu-se uma variação na motilidade dos grupos (T40: 21,5 ± 6,402; T60= 16,33 ± 5,188; T90= 12,00 ± 4,719) e não diferiu entre eles (P>0,05). Observou-se também que, com sêmen congelado, o grupo Centrífuga selecionou espermatozoides mais íntegros no primeiro momento (T0), em comparação com o grupo Sperm Filter. Contudo, mais estudos devem ser feitos com o objetivo de elucidar por quais motivos o grupo Centrífuga foi mais eficaz aos demais grupos com relação aos demais grupos, no primeiro momento depois de descongelados.


Keywords


Centrifugação, Criopreservação, Sperm Filter, Sêmen Equino.

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DOI: https://doi.org/10.34117/bjdv7n6-580

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